Tsvetkov, Ts. S. & D. B. Daskalova, 2024. Protein factors of capacitation and decapacitation in canine seminal plasma. Bulg. J. Vet. Med., 27, No 1, 15-26.

 

DOI: 10.15547/bjvm.2021-0130

 

The aim of the present study was to determine the proteins in canine seminal plasma with direct effect on specific sperm parameters during fertilisation. The influence of seminal plasma proteins was focused on three processes: capacitation, hyperactivation and decapacitation. Size exclusion chromatographic fractional separation of proteins from seminal plasma based on their molecular weights was performed. In addition, two-dimensional electrophoresis of two seminal protein fractions was done. The effect of protein molecules on the motion and kinetic parameters of the male gametes in in vitro conditions was monitored by computer-assisted sperm analysis. The activity of alkaline phosphatase, creatine kinase and alanine aminotransferase in whole seminal plasma and each chromatography fraction was measured spectrophotometrically using the BA-88A semi-automatic chemistry analyzer. The protein fractions with different molecular weights affected the in vitro motility and kinetic characteristics (curvilinear velocity, straightness, linearity and amplitude of lateral head displacement) of spermatozoa, leading to hyperactivation or initiating decapacitation kinetics changes. The detailed study of the seminal plasma proteome would add fundamental information about the processes associated with physiological changes occurring in spermatozoa before fertilisation. The study of the canine seminal plasma proteome could add relevant information about its effects on the fertilising ability of the male gametes and the changes occurring in them before fertilisation.

Key words: chromatography, proteins, spermatozoa, two-dimensional electrophoresis

 

Цветков, Ц. С. & Д. Б. Даскалова, 2024. Протеинови фактори за капацитация и декапацитация в семенната плазма при кучета. Bulg. J. Vet. Med., 27, No 1, 15-26.

 

DOI: 10.15547/bjvm.2021-0130

Целта на настоящото изследване бе да се определят протеините в семенна плазма при кучета с директен ефект върху специфичните параметри на спермата по време на оплождането. Влиянието на спермените плазмени протеини е фокусирано върху три процеса: капацитация, хиперактивация и декапацитация. Беше извършено гел-хроматографско фракционно разделяне на протеини от семенната плазма с изключване по размер на базата на техните молекулни тегла. Освен това беше направена двумерна електрофореза на две спермени протеинови фракции. Ефектът на протеиновите молекули върху движението и кинетичните параметри на мъжките гамети в in vitro условия се наблюдаваше чрез CASA анализ. Активността на алкалната фосфатаза, креатин киназата и аланин аминотрансферазата в цялата семенна плазма и всяка хроматографска фракция се измерваше спектрофотометрично с полуавтоматичен химичен анализатор BA-88A. Протеиновите фракции с различни молекулни тегла влияеха на in vitro подвижността и кинетичните характеристики (криволинейна скорост, праволинейност, линейност и амплитуда на странично изместване на главата) на сперматозоидите, което водеше до хиперактивиране или иницииране на декапацитационни кинетични промени. Подробното изследване на протеома на семенната плазма би дало фундаментална информация за процесите, свързани с физиологичните промени, настъпващи в сперматозоидите преди оплождането. Изследването на спермения плазмен протеом при кучетата може да даде подходяща информация за неговите ефекти върху оплодителната способност на мъжките гамети и промените, настъпващи в тях преди оплождането.

Ключови думи: хроматография, протеини, сперматозоиди, двуизмерна електрофореза