Soliman, R., M. M. Magdy, A. Samir, Y. A. Abdalla & R. H. Sayed, 2021. Development of immunochromatographic lateral flow test for rapid detection of Clostridium perfringens α, β and ε toxins in clinical samples. Bulg. J. Vet. Med., 24, No 4, 497-507.

 

DOI: 10.15547/bjvm.2019-0131

 

In the present work a lateral flow immunochromatographic test (LFT) for rapid detection of Clostri­dium perfringens toxins types, alpha (α), beta (β) and epsilon (ε) in clinical samples was developed. C. perfringens toxins were prepared, purified and inactivated with 0.2% formalin. Polyclonal antibodies specific to C. perfringens toxins types α, β and ε toxoids were prepared in rabbits and guinea pigs. The toxoid specific polyclonal antibodies prepared in rabbits were labelled with gold chloride nanoparticles. The prepared toxin specific rabbit and guinea pigs antibodies and goat anti-rabbit antibodies were utilised in development of a lateral flow immunochromatographic test and the latter - evaluated for detection of C. perfringens α, β and ε toxins in clinical samples. The sensitivity and specificity and accuracy of the developed LFT were determined by comparison with a commercially available ELISA used for detection of these toxins. The prepared LFT was capable to detect C. perfringens α, β and ε toxins in quantities of 2 μg/ml, 250 ng/ml and 60 ng/ml, respectively. One hundred poultry suspected faecal samples was examined both with the prepared LFT and commercial ELISA to test the validity of developed LFT. The sensitivity, specificity and accuracy of the LFT for detection of C. perfringens toxins were 81%, 95.2% and 90%, respectively, for α toxin, 76.6%, 98.5% and 72%, respectively, for β toxin and 66.6%, 98.8% and 95%, respectively, for ε toxin.

Key words: C. perfringens α, β and ε toxins, lateral flow test (LFT)

 

Soliman, R., M. M. Magdy, A. Samir, Y. A. Abdalla & R. H. Sayed, 2021. Разработване на имунохроматографски тест с латерален поток за бърза детекция на α, β и ε токсини от Clostridium perfringens в клинични проби. Bulg. J. Vet. Med., 24, No 4, 497-507.

 

DOI: 10.15547/bjvm.2019-0131

 

В настоящата работа е разработен имунохроматографски тест с латерален поток (LFT) за бърза детекция на алфа (α), бета (β) и епсилон (ε) токсини от Clostridium perfringens в клинични проби. Токсините от C. perfringens бяха приготвени, пречистени и инактивирани с 0.2% формалин. Бяха приготвени поликлонални антитела, специфични за токсини α, β и ε на C. perfringens при зайци и морски свинчета. Специфичните поликлонални антитела от зайци бяха маркирани с наночастици от аурихлорид. Приготвените токсин-специфични антитела от зайци и морски свинчета и кози анти-заешки антитела бяха използвани за разработване на имунохроматографски тест с латерален поток, който след това бе оценен за детекция на α, β и ε токсини от C. perfringens в клинични проби. Чувствителността,  специфичността и точността на разработения LFT бяха определени спрямо ELISA предлаган в търговската мрежа за установяване на тези токсини. Приготвеният LFT бе способен да установи α, β и ε токсини на C. perfringens в количества съответно 2 μg/ml, 250 ng/ml and 60 ng/ml. Сто съмнителни фекални проби от пилета бяха изследвани едновременно с разработения LFT и търговски ELISA кит за тестване на валидността на LFT. Чувствителността,  специфичността и точността на LFT за детекция на токсините на C. perfringens бе както следва: 81%, 95.2% и 90%, за α токсин, 76.6%, 98.5% и 72% за β токсин и 66.6%, 98.8% и 95% за ε токсин.

Ключови думи: C. perfringens α, β и ε токсини, тест с латерален поток (LFT)