Soliman, S. M., H. S. Soliman, H. I. Mohamed, M. A. Salem & S. A. Ahmed, 2020. Diagnostic performance of RFLP-PCR and sarcosine based indirect ELISA versus immunoassays in Brucella infected and vaccinated small ruminants. Bulg. J. Vet. Med., 23, No 3, 319-330.

DOI: 10.15547/bjvm.2217

This study was carried out for evaluation of the diagnostic performance of different serological assays; buffered acidified plate antigen test (BAPAT), rose bengal plate test (RBPT), immunochromatographic assay (ICA), rivanol test (RivT), indirect ELISA using two types of coating antigens (smooth lipopolysaccharide; S-LPS and N-lauroylsarcosine-extracted antigens; SE) and complement fixation test (CFT). Relative sensitivity and specificity of various techniques were estimated. The traditional serological tests failed to distinguish the vaccinated from naturally infected animals. Using iELISA with extracted antigens (SE) as a coating antigen was a more accurate test to differentiate the naturally infected animals from vaccinated animals. Application of restriction fragment length polymorphism polymerase chain reaction (RFLP-PCR) on sera samples from seropositive animals, Rev-1 vaccinated sheep and Brucella field strain infected sheep and goats revealed that there were samples identified as B. melitensis biovar 3 field strain and other samples identified as B. melitensis Rev-1 vaccinal strain. The obtained results established that restriction fragment length polymorphism-polymerase chain reaction can differentiate between animals infected with Brucella field strains from animals vaccinated with the Rev-1 vaccine.

Key words: B. melitensis Rev-1 vaccine, ELISA, RFLP-PCR, sarcosine, serological assays

Soliman, S. M., H. S. Soliman, H. I. Mohamed, M. A. Salem & S. A. Ahmed, 2020. Диагностични характеристики на RFLP-PCR и индиректна ELISA на база саркозин спрямо имуноанализ при ваксинирани дребни преживни, заразени с Brucella. Bulg. J. Vet. Med., 23, No 3, 319-330.

DOI: 10.15547/bjvm.2217

Това проучване бе извършено за оценка на диагностичните характеристики на различни серологични анализи – тест с буфериран антиген (BAPAT), розбенгалов тест (RBPT), имунохроматографски тест (ICA), риванолов тест (RivT), индиректна ELISA с 2 типа покривни антигени (гладък липополизахарид; S-LPS и N-лаурилсаркозин-екстрахирани антигени; SE) и тест с фиксация на комплемента (CFT). Определени са чувствителността и спефицичността на различните техники. Традиционните серологични тестове не разграничиха ваксинираните от естествено заразените животни. iELISA с екстрахирани антигени (SE) като покривен антиген бе по-точен тест за разграничаване на естествено заразените от ваксинираните животни. Приложението на RFLP-PCR за серумни проби от серопозитивни животни - овце ваксинирани с Rev-1 и овце и кози, заразени с теренен щам на Brucella показа проби, идентифициран като теренен щам B. melitensis биовар 3 и проби, идентифицирани като ваксинален щам B. melitensis Rev-1. Получените резултати доказаха, че RFLP-PCR може да разграничи животни, заразени с теренен щам Brucella от тези, ваксинирани с ваксина Rev-1.