Jamshidian-Mojaver, M., S-E. Tabatabaeizadeh, M. Naeemipour, H. R. Farzin & M. R. Bassami, 2020. Use of degenerate oligonucleotide primed polymerase chain reaction for detection of chicken anaemia virus contamination in avian viral vaccines. Bulg. J. Vet. Med., 23, No 3, 304-309.

DOI: 10.15547/bjvm.2230

For quality control of biologicals of veterinary use, the absence of extraneous agents needs to be certified. One of the requirements for quality control of avian viral vaccines is to demonstrate freedom from extraneous and adventitious pathogenic agents, like chicken anaemia virus (CAV). In this study, a degenerate oligonucleotide primed PCR (DOP-PCR) for the detection of CAV was developed. Degenerate oligonucleotide primers were selected based on sequences corresponding to conserved regions of VP1 gene. After spiking of CAV genomic DNA to an infectious laryngotracheitis virus (ILTV) vaccine, detection limit for the test was 3.056×10^-9 ng/µl. To evaluate the performance of the test, 11 avian viral vaccines including infectious bronchitis virus (IBV), newcastle disease virus (NDV), infectious bursal disease virus (IBDV) and ILTV vaccines from 5 manufacturers were screened for CAV and no contamination was detected. The test described here may provide a rapid, sensitive and specific method for contamination detection of avian viral vaccines with CAV, and may be applied for quality control of live and killed commercial vaccines.

Key words: avian viral vaccines, chicken anaemia virus (CAV), quality control

Jamshidian-Mojaver, M., S-E. Tabatabaeizadeh, M. Naeemipour, H. R. Farzin & M. R. Bassami, 2020. Използване на полимеразно-верижна реакция с дегенеративни олигонуклеотидни праймери за детекция на замърсяване на вирусни ваксини за птици с вируса на инфекциозната анемия по пилетата. Bulg. J. Vet. Med., 23, No 3, 304-309.

DOI: 10.15547/bjvm.2230

За контрол на качеството на биопродукти за ветеринарна употреба е необходимо сертифициране на липсата на други агенти. Едно от изискванията на качествен контрол на ваксините против птичи вируси е липса на допълнителни и случайни патогени, като например вируса на инфекциозната анемия по пилетата (CAV). В това проучване е разработен  PCR протокол с дегенеративни праймери (DOP-PCR) за детекция на CAV. Дегенеративните олигонуклеотидни праймери бяха избрани на база секвенции съответстващи на консервирани региони от VP1 ген. След спайкинг на геномна ДНК от CAV към ваксина срещу вируса на инфекциозния ларинготрахеит (ILTV), границата на детекция на теста бе 3.056×10^-9 ng/µl. За оценка на параметрите на теста, 11 вирусни ваксини вкл. срещу вируса на инфекциозния бронхит (IBV), вируса на нюкясълската болест (NDV), вируса на инфекциозния бурзит (IBDV) и ILTV от 5 производители бяха изследвани за CAV и не бе устaновено контаминиране. Описаният метод е бърз, чувствителен и специфичен за установяване на контаминиране на вирусни ваксини за птици с CAV, и може да се използва за качествен контрол на живи и убити комерсиални ваксини.