Kalantari, A., T. Naserpour Farivar, A. Peymani, M. Aslanimehr & R. Bagheri Nejad, 2019. Extraction and characterisation of Brucella abortus strain RB51 rough lipopolysaccharide. Bulg. J. Vet. Med., 22, No 2, 152–162.

DOI: 10.15547/bjvm.2050

Brucellosis is an important zoonotic disease with considerable impacts on human and animal health. Brucella abortus strain RB51 vaccine is used for prevention of bovine brucellosis in Iran. Due to strain roughness, available serological tests cannot detect vaccinated animals. Detection of serological responses to the vaccine is important to monitor accurate vaccination implementation. Rough lipopolysaccharide (RLPS) of RB51 strain was extracted and characterised to develop serological tests for diagnosis of vaccinated animals. RLPS was extracted using phenol-chloroform-petroleum ether and evaluated by limulus amebocyte lysate (LAL) assay, sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and agar gel immunodiffusion (AGID). According to our results, the extracted RLPS caused positive reaction in LAL assay. In SDS-PAGE, a band with a molecular weight around 14 kDa was identified after specific staining using silver nitrate. Double AGID of the RLPS with a hyperimmune serum resulted in a precipitation line formation. Our study showed that the method can be successfully used to extract RLPS from Brucella abortus strain RB51 as confirmed by LAL assay, PAGE and AGID.

Key words:  brucellosis, RB51 vaccine, rough lipopolysaccharide

Kalantari, A., T. Naserpour Farivar, A. Peymani, M. Aslanimehr & R. Bagheri Nejad, 2019. Екстракция и характеристика на грапав полизахарид от Brucella abortus щам RB51. Bulg. J. Vet. Med., 22, No 2, 152–162.

DOI: 10.15547/bjvm.2050

Бруцелозата е важна зооноза със значителни последици за здравето на хората и животните. Ваксината от Brucella abortus щам RB51 се използва за предпазване на говедата от бруцелоза в Иран. Поради особеностите на щама, наличните серологични тестове не могат да установят ваксинираните животни. Детекцията на серологичния отговор към ваксината е важен за проследяване на правилното и прилагане. Грапавият липополизахарид  (RLPS) на щама RB51 бе екстрахиран и характеризиран за разработване на серологични тестове за диагностика на ваксинираните животни. RLPS бе екстрахиран с фенол-хлороформ-петролиев етер и изследван с лимулус амебоцит лизат (LAL) анализ, SDS-PAGE електрофореза и имунодифузия в агаров гел (AGID).  Както сочат резултатите, екстрахираният RLPS даде положителна реакция в LAL анализа. Чрез SDS-PAGE бе идентифицирана ивица с молекулно тегло около 14 kDa след оцветяване със сребърен нитрат. Двойният AGID на RLPS с хиперимунен серум доведе до получаване на преципитационна линия. Нашето проучване показа, че методът може да бъде използван успешно за екстрахиране на RLPS от Brucella abortus RB51 както бе потвърдено от LAL, PAGE и AGID анализите.

Ключови думи: бруцелоза, RB51 ваксина, грапав липополизахарид