Almadaly, E. A., F. A. Farrag & N. El. Nasr, 2019. Protein and lipid species in seminal plasma of fertile Holstein-Friesian bulls. Bulg. J. Vet. Med., 22, No 1, 66–81.

DOI: 10.15547/bjvm.2019

Protein and lipid molecules in seminal plasma (SP) collected from fertile bulls were investigated. Semen was collected from 10 bulls (2 ejaculates each) and examined for standard semen analysis. Raw SP was recovered by centrifugation and total protein (TP) concentration was determined using a refractometer. Raw SP was desalted using a Sephadex G-25 desalting column then both raw and desalted SP was subjected to SDS-PAGE. Neutral lipids and phospholipids of raw and desalted SP were separated by thin-layer chromatography (TLC). The results revealed that, all bulls had normal semen characteristics and TP concentration in SP ranged from 7.0 to 10.4 g/dL except bull No. 6 had a relatively low concentration of 4.9 to 6.8 g/dL. Neither proteins nor lipids species were different between raw and desalted SP. Seventeen proteins were detected ranging from 8.5 to 185.8 kDa, and those of 12, 13.5, 15, 21, 23 and 38 kDa were predominant. Notably, proteins of 10, 17.5, 19, 21, 80 and 185.8 kDa might be new candidates of SP proteins (SPPs). The detected neutral lipid spots corresponded to cholesterol, 1,2-dimyristoyl glycerol, 1,2-dioleoyloglycerol, 1,3-dimyristoyl glycerol and 1,3-dioleoyloglycerol. The detected phospholipids spots corresponded to non-migrating phospholi­pids, sphingomyelin (SM), phosphatidylcholine (PC), phosphatidylserine (PS), phosphatidylinositol (PI), phosphatidylethanolamine (PE), cerebroside and polyglycerol phosphatide. Cholesterol represents the major molecule of neutral lipids, whereas SM, PC, PI and PE represent the major phospho­lipids. Noteworthy, there were 2 species of diacylglycerol (DAG) and 3 species of PI in bovine SP. In conclusion, this study gave a general picture of SP protein and lipid species in fertile bull semen, which might serve as fundamental knowledge for either semen analysis or prediction of male fertility.

Key words: cholesterol, desalted SP, fertility, Holstein-Friesian bulls, SP proteins

Almadaly, E. A., F. A. Farrag & N. El. Nasr, 2019. Протеинови и липидни видове в семенната плазма на фертилни Холщайн-фризийски бикове. Bulg. J. Vet. Med., 22, No 1, 66–81.

DOI: 10.15547/bjvm.2019

Изследвани са протеиновите и липидните молекули в семенната плазма (СП) на фертилни бикове. Спермата бе получена от 10 бика (2 еякулата от всеки) и подложена на стандартен анализ. Суровата СП бе получена чрез центрофугиране, а съдържанието на общ белтък (TP) - определено рефрактометрично. Суровата СП бе обезсолена на колона Sephadex G-25, като и суровата, и обезсолената СП бяха подложени на SDS-PAGE анализ. Неутралните липиди и фосфолипиди на суровата и обезсолена СП са разделени с тънкослойна хроматография. Резултатите показват, че всички бикове имаха нормални параметри на спермата с концентрации на TP от 7.0 дo 10.4 g/dL с изключение на бик № 6 чийто общ белтък бе сравнително нисък: 4.9 дo 6.8 g/dL. Суровата и обезсолена СП не се различаваха по съдържанието на протеини и липиди. Между 8.5 to 185.8 kDa бяха открити 17 протеини, като преобладаваха тези с големина 12, 13.5, 15, 21, 23 и 38 kDa. Протеините с 10, 17.5, 19, 21, 80 и 185.8 kDa може да са нови кандидати за протеини в СП (SPPs). Откритите неутрални липиди съответстваха на холестерол, 1,2-димиристоил глицерол, 1,2-диолеоил глицерол, 1,3-димиристоил глицерол и 1,3-диолеоил глицерол. Откритите фосфолипиди съответстваха на немигриращи фосфолипиди, сфингомиелин (SM), фосфатидилхолин (PC), фосфатидилсерин (PS), фосфатидилинозитол (PI), фосфатидилетаноламин(PE), цереброзид и полиглицерол фосфатид. Холестеролът бе главната молекула измежду неутралните липиди, докато SM, PC, PI и PE са главните фосфолипиди. В семенната плазма на бика имаше 2 вида диацилглицерол (DAG) и 3 вида PI. В заключение, проучването представя обща картина на протеините и липидите в семенната плазма от фертилни бикове, което може да служи като основа за анализ на спермата или за прогнозиране на фертилността на разплодниците.

Ключови думи: холестерол, обезсолена семенна плазма, фертилност, Холщайн-фризийски бикове, протеини в семенната плазма